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八年研究愈两万蚊子 深圳发现国内首株南定病毒 

2017-05-29
工作人员晚放晨收捕蚊。

工作人员晚放晨收捕蚊。

成蚊标本的病毒检测。

成蚊标本的病毒检测。

工作人员将标本进行测序。

工作人员将标本进行测序。

【文汇网讯】 (香港文汇网 记者 石华)随着夏季的到来,蚊虫让很多人生厌。然而在深圳市龙岗区疾病预防控制中心,工作人员花了8年的时间研究2万多只蚊子,最终在4批致倦库蚊标本中检测到我国首株、全球第二株新型虫媒病毒Na inh病毒(下称南定病毒),填补了国内空白。

3年捕获成蚊两万余只

谈起此事的缘由,还与深圳大运会有关。2009年,为保证大运会顺利召开,龙岗区疾控中心启动了虫媒传染病的预防工作。从2009年3月到2011年9月,龙岗区疾控中心在龙岗区所有街道及22个大运场馆、指定公共场所、民宅等室内外环境设立监测点,选用诱蚊灯捕获法、晚放晨收采集成蚊。

在此期间,共布放诱蚊灯1598盏,捕获成蚊25556只。成蚊被毫发无伤地带回了龙岗疾控中心实验室,保存在-196℃的液氮罐中。龙岗区疾控中心微生物检验科科员周健明表示:「低温条件下才能保证蚊子携带的病毒存活,进而有研究价值。」

「除了保障大运会之外,疾控部门还要看能否发现新的病原体。」周健明称,龙岗区疾控中心完成了成蚊标本的病毒检测,检测到4株疑似乙脑病毒弱阳性。工作人员把这4株标本进行测序后,意外地发现,它们均与2011年全球首次在越南发现的南定病毒同源性高达90%。

这一发现,让龙岗疾控的工作人员喜出望外,通过与广东药科大学合作研发,量身定制了一整套科学权威的病毒鉴定方法,拟从分子学、生物学、形态学等多方面对该病毒进行鉴定。2013年5月,课题组将病毒测序结果,上传至国际基因序列数据库,获得唯一认可编号。今年2月份,该研究成果成功发表在Scientifi eports期刊上。

破解蚊子的邪恶「密码」

南定病毒是否有致病性?周健明表示,目前尚不明确。「对病毒进行鉴定认可后,还要通过动物实验、人群检测、临床实验等一些列的检测才能知道是否致病性,目前正处于研究致病性的动物实验阶段。」

「目前美国、东南亚、非洲以及中国都在研究南定病毒,但英文论文数量不到10篇。」周健明告诉记者,按推理来说,很多蚊子都携带这个病毒,如果能够致病,应该早就在人群中爆发。

香港与深圳一河之隔,深圳的参考是否对香港有所启示?周健明称,目前所采集的样本都是龙岗区的,按目前的检测技术,无法精确到每只成蚊是否携带病毒,只能按一到两百只成蚊为一批进行检测,看是否携带病毒。「这些数据只能参考,具有地域分布局限性,香港是否适用不好说。」

龙岗区疾控中心表示,下一步将深入开展南定病毒在人群中感染情况的研究。

培养病毒细胞比养孩子还难

周健明参与了南定病毒分离和鉴定,以及后期的论文撰写工作。在工作中,周健明和同事们遇到了不少困难,但最难的就是细胞培养,用他的话说:「养细胞简直比养孩子还难,跟餵奶、换尿片一样。」

为了培养细胞,周健明得给细胞「做大餐」,用不同的培养基给不同细胞提供营养,过段时间还得更换培养液,除去代谢废物。而且细胞培养和病毒分离对环境的要求特别高,必须保持在27摄氏度的恒温条件下,必须无菌培养,然而这个温度条件也利于细菌的生长。所以就算在培养过程中,对细胞细心呵护,操作中特别小心,细胞仍可能出现微生物污染等状况。并且蚊虫的细胞非常娇弱,稍不留意就会前功尽弃。

相对于微生物检验科的工作难度,将这些蚊子带回来的消毒杀虫科的工作也不轻松。蚊子必须一一剪去蚊子细小的翅膀和腿,留下主要的躯干才能成为样本。有时,一个晚上可以处理1000多只蚊子,龙岗区疾控中心消杀科科员沈培林笑称「剪蚊子腿才真是技术活,眼睛都要看花了。」

研究样本选择都是雌性成蚊

「该怎么分辨蚊子的性别呢?」沈培林向记者介绍,蚊子可根据触角区分其雌雄,雄蚊触角上的绒毛多且细密,就像一把试管刷;而雌蚊则没有。通常公蚊子吸食植物的汁液,一般不会接近人类,雌性蚊子为繁殖后代,主要以血液作为食物,也就是说只有雌性蚊子才会咬人,因此研究样本选择都是雌性成蚊。

不同种类的蚊子一般人用肉眼难以辨别,需要使用光学显微镜观察其翅膀上的斑点和体色才能辨认。沈培林说,深圳市常见的蚊子主要包括:库蚊属的致倦库蚊、伊蚊属的白纹伊蚊和按蚊属的嗜人按蚊和中华按蚊等。

人们在户外活动时,经常会发现头上有一大群蚊子狂舞,令人烦心。事实上,这是摇蚊,并不咬人。摇蚊和蚊子的区别在于摇蚊在静止时,前足不断摇动。摇蚊口器退化,雄性摇蚊在成虫后基本上不进食,雌性摇蚊为传宗接代产卵补充能量,会吸食一些植物的汁液。沈培林称,摇蚊在人们头上飞舞时只是在交配,大可不必担心。

话你知:南定病毒

2011年,PLOS Pathogens期刊报道全球首篇Na inh病毒的研究,该病毒于2002年在越南急性脑炎病人的脑脊液中分离成功,并于2005年在当地库蚊标本中也分离得到,日本作者Phan Th ga将其命名为Nam Dinh Virus(NDiV)病毒。因在越南南定省发现,国内称为南定病毒。

南定病毒是全球首次发现的昆虫节肢类动物携带的套式病毒,由于该病毒形态学与基因编码结构和冠状病毒相似,国外认为此病毒是SARS病毒为代表的冠状病毒进化分支的一个重要组成部分。国内病毒学权威杂志《病毒学报》在2013年首期发表了龙岗区疾控中心的研究成果,正式宣告中国国内存在南定病毒。目前国内外对南定病毒的研究较少,尚无研究资料显示南定病毒对哺乳类动物有致病性。

责任编辑:京辰

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